鱼肉中孔雀石绿的检测||分子印迹固相萃取-高效液相色谱法 

采用孔雀石绿分子印迹柱，建立了鱼肉中孔雀石绿的液相色谱检测方法。该方法低、中、高三个水平的加标回收率均在85-90 %之间，RSD小于2 %，操作简便快捷，能够作为客户鱼肉中孔雀石绿的参考方法。

 

一、样品提取

鱼去鳞、皮，沿背脊取肌肉，粉碎均匀后，取鱼肉试样2 g(精确至0.01 g)，加入2 g NaCl，再加入 15 mL 70%乙腈水，涡旋震荡10 min，超声提取10 min，以10000 r/min转速离心5 min，移取全部上清液至离心管中；将所得的上清液中加入等体积的去离子水，混匀，作为待净化液。

二、样品净化

活化：依次用3.0 mL乙腈和3.0 mL去离子水平衡MISPE柱；

上样和淋洗：移取所得样品提取液过柱，再用3.0 mL的水淋洗，弃去淋洗液；

洗脱：用3.0 mL甲醇-乙酸（9:1，V/V）洗脱，收集洗脱液；

重新溶解：洗脱液经氮吹浓缩至近干，用1.0 mL 乙腈溶解，过0.45 μm有机滤膜，进行上机测定。

注：整个过程控制流速不要超过1 mL/min。

三、 、仪器条件

液相色谱条件

仪器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific）

色谱柱：Agilent C18 (4.6 mm×250 mm，5μm)

流动相：乙腈：50mM乙酸铵(0.1%乙酸)=60:40

检测波长：620 nm

流速：1.2 mL/min

柱温：30 ℃

进样量：20 μL

四、实验结果