一、样品提取
称取粉碎好的普洱2.00g(精确到0.01g)，加入50mL离心管中，加10mL水涡旋混匀，再加10mL乙腈，7g NaCl，剧烈振荡1min，静置30min，4000r/min离心5min，上清液待净化。
二、SPE柱净化（GCB/NH2，500mg/500mg/6mL）
(1)活化：GCB/NH2固相萃取柱中加入约2cm高无水硫酸钠，使用前使用10mL乙腈-甲苯(3:1,v/v)活化。
(2)上样和洗脱：当溶液液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液4mL,用鸡心瓶接收流出液，逐步加入25mL乙腈-甲苯(3:1,v/v)洗涤小柱，收集上述所有流出液于鸡心瓶中。
(3)重新溶解：流出液于40℃水浴中旋蒸至1mL左右，加入2mL乙腈转移至10mL试管中，于40℃下氮气吹干，
加入1mL乙腈溶解残渣，0.22μm微孔滤膜过滤，分别供GC-ECD和LC-MS/MS上机测试。
三、仪器条件
GC-ECD条件：
气相仪器：Agilent7890A
色谱柱：AgilentJ&WHP-5(30m×0.32mm,0.25μm)或者相当者
进样口温度：220℃
检测器温度：300℃
升温程序：180℃(保持2min)
以10℃/min升温到230℃(保持2min)
以2℃/min升温到260℃(保持2min)
以25℃/min升温到270℃(保持1.6min)
载气：氦气
流速：1.6mL/min
进样方式：分流进样，分流比10:1
LC-MS/MS条件：
质谱仪：API4000
色谱柱：VenusilASBC18(2.1mm×150mm,5μm)
流动相：A：0.1%HCOOH+10mM乙酸铵(取1mLHCOOH和0.77g乙酸铵至1L水溶液中)
B：甲醇
表1流动相梯度洗脱
|
时间/min |
A(%) |
B(%) |
|
---- |
95.0 |
5.0 |
|
1.5 |
95.0 |
5.0 |
|
6.0 |
5.0 |
95.0 |
|
11.0 |
5.0 |
95.0 |
|
11.1 |
95.0 |
5.0 |
|
15.0 |
95.0 |
5.0 |
流速：0.35mL/min
柱温：40℃
进样体积：5μL
离子源：电喷雾(ESI)
扫描模式：正离子模式
检测方式：多反应监测(MRM)
表2：质谱仪离子源参数
|
Source/Gas |
|
|
CollisionGas(CAD) |
6 |
|
CurtainGas(CUR) |
12 |
|
IonSourceGas1(GS1) |
50 |
|
IonSourceGas2(GS2) |
50 |
|
IonSprayVoltage(IS) |
5500 |
|
Temperature(TEM) |
550 |
|
InterfaceHeater(ihe) |
On |
表3：氨基甲酸酯类农药各组分名称、保留时间及母离子和子离子检测离子对
|
物质名称 |
保留时间（min） |
检测离子对 |
DP |
EP |
CE |
CXP |
|
涕灭威
|
7.06
|
208.1/89.1 |
30 |
10 |
22 |
12 |
|
208.1/116.0 |
30 |
10 |
10 |
12 |
||
|
克百威 |
7.13 |
222.3/123.1 |
48 |
10 |
16 |
12 |
|
222.3/165.2 |
48 |
10 |
31 |
12 |
||
|
涕灭威砜
|
6.25 |
223.1/86.2 |
69 |
10 |
21 |
12 |
|
223.1/148.1 |
69 |
10 |
13 |
12 |
||
|
涕灭威亚砜
|
6.10 |
207.1/132.2 |
60 |
10 |
13 |
12 |
|
207.1/89.1 |
60 |
10 |
22 |
12 |
||
|
啶虫脒
|
6.83 |
223.4/126.1 |
70 |
10 |
29 |
12 |
|
223.4/90.0 |
70 |
10 |
46 |
12 |
四、实验结果
表4：0.25mg/kg普洱中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留的添加回收结果
|
名称 |
回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
||
|
1 |
2 |
3 |
|||
|
乙烯菌核利 |
84.5 |
76.0 |
80.0 |
80.2 |
5.3 |
|
腐霉利 |
110.5 |
102.0 |
105.0 |
105.8 |
4.1 |
|
异菌脲 |
112.0 |
107.5 |
119.0 |
112.8 |
5.1 |
|
联苯菊酯 |
94.5 |
87.5 |
90.5 |
90.8 |
3.9 |
|
甲氰菊酯 |
109.5 |
100.0 |
106.5 |
105.3 |
4.6 |
|
高效氟氯氰菊酯 |
84.0 |
79.5 |
82.5 |
82.0 |
2.8 |
|
氟氯氰菊酯 |
86.5 |
86.8 |
94.1 |
89.1 |
4.8 |
|
氟氯戊菊酯 |
120.5 |
114.0 |
120.0 |
118.2 |
3.1 |
|
氰戊菊酯 |
95.5 |
85.0 |
92.9 |
91.1 |
6.0 |
|
氟胺氰菊酯 |
70.4 |
72.8 |
81.0 |
74.7 |
7.4 |
表5：0.05mg/kg普洱中氨基甲酸酯类农药多残留的添加回收结果
|
名称 |
回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
||
|
1 |
2 |
3 |
|||
|
涕灭威 |
95.6 |
87.2 |
90.0 |
90.9 |
4.7 |
|
克百威 |
84.4 |
78.0 |
82.2 |
81.5 |
4.0 |
|
涕灭威砜 |
77.4 |
83.0 |
81.4 |
80.6 |
3.6 |
|
涕灭威亚砜 |
70.0 |
74.4 |
75.0 |
73.1 |
3.7 |
|
啶虫脒 |
82.4 |
94.0 |
88.4 |
88.3 |
6.6 |
五、订购信息
|
货号 |
描述 |
包装 |
|
JYGCBHN655 |
GCB/NH2固相萃取柱，500mg/500mg/6mL |
30支/盒 |
|
SF130-22-NL |
尼龙针式过滤器，直径13mm，孔径0.22μm，有机系 |
100个/盒 |
|
MF047-45-MCE |
混合纤维素滤膜，直径47mm，孔径0.45μm，水系 |
100片/盒 |
|
MF047-45-PTFE |
聚四氟乙烯滤膜，直径47mm，孔径0.45μm，有机系 |
100片/盒 |
|
SPEMF12G |
12位固相萃取负压装置，玻璃缸体，含流量调节阀等附件 |
1个/盒 |
