玉米赤霉烯酮免疫亲和柱

1、用途：

免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的玉米赤霉烯酮，从而对 样品起到非常针对性的净化作用，过柱净化后的样品液可直接用 于 HPLC 分析或氮吹复溶后用 LC-MS/MS 分析。

2、概述：
玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）又称 F-2 毒素 ，主要 由镰刀菌属菌株产生，其成分为禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌等产生 的 2 ，4-二羟基苯甲酸内酯类化合物。

3、原理：

测定的基础是抗原、抗体反应，抗体连接在柱体内，样品经 过提取、过滤后，缓慢的通过玉米赤霉烯酮免疫亲和柱，在免疫 亲和柱内毒素与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合 的其他无关物质。用甲醇洗脱玉米赤霉烯酮，然后注入到分析仪 器中用于检测。

4、包装组成：

每一个盒中包括各种规格的玉米赤霉烯酮免疫亲和柱及 1份 说明书。

5、注意事项：
----使用前 ，免疫亲和柱需回至室温（ 22～25℃) 。
----亲和柱2～8℃储存 ，不得冻存；冰箱内建议不要贴壁放置， 产品易冻 ，影响性能！
----不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
----取样量：根据需要可以适当增加或减少取样量 ，注意提取液 量要相应改变。
----柱容量：2000ng，当样本中待检毒素的含量除以稀释倍数高 于柱容量时 ，需要适当降低上样液的体积 ，重新检测。
----pH：亲和柱的上样溶液 pH需在 6～8 之间 ，若偏离此范围 需要用盐酸或氢氧化钠调节 pH。
----玉米赤霉烯酮可致癌 ，应戴手套口罩的等防护工具操作。
----使用过的容器及标准品溶液最好用次氯酸钠溶液（ 5%V/V） 浸泡过夜。
----上机检测时的溶剂与流动相保持一致 ，可以消除溶剂效应的 影响。

6、配液：
提取液 ：90%乙腈
----用量筒移取 900mL 乙腈 ，加入超纯水定容至至 1L。

7、样品处理：粮食及饲料
----20g±0.01g 样品（固体样品需粉碎，并过 2mm分样筛）加 入 100mL 提取液（ 90%乙腈-水溶液）混匀；
----高速均质  ( ≥10,000r/min ） 1min ，或摇床（ 200r/min ~   300r/min）剧烈振荡 20min，用快速定性滤纸过滤，收集滤液；
----取 10mL 滤液加入 40mL 水稀释（必要时可离心或过滤）， 混匀作为上样液；
----取 25mL 上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数：1

8、操作程序：

----取出免疫亲和柱 ，将注射器筒的下端直接穿透亲和柱上方的 塞子，完成注射器筒与亲和柱的连接，将其放置在气控操作架上 进行固定；
----取步骤 7 中上样液 ，注入到注射器筒中；
----去掉亲和柱下方堵头 ，使液体以 1～2 滴/秒速度流出；
----待液体排干后 ，用 10mL 水洗涤 2 次 ，流速 2～3 滴/秒；
----待液体排干后 ，上样 2mL 甲醇 ，流速 1 滴/秒 ，收集洗脱液 并在 55℃以下氮气吹干 ，然后用 1mL 流动相复溶；
----复溶液用 0.22μm  微孔滤器过滤后转移至样品瓶中用于 HPLC 或 LC-MS 等仪器分析。
----洗脱液用 0.22μm微孔滤器过滤后转移至样品瓶用于 HPLC 分析。
* 每次上样前都要将上次液体完全排干。
* 也适用于 GB 5009.209-2016 和 GB/T 28716-2012。

9、结果判读：

玉米赤霉烯酮的含量 =检测浓度×稀释倍数

10、贮藏条件及有效期：

贮藏条件 ：2～8℃。
有效期：该产品有效期为 18 个月。