动物源性食品中利巴韦林残留量的UPLC-MS/MS分析(PBA固相萃取柱)
动物源性食品中利巴韦林残留量的UPLC-MS/MS分析(PBA固相萃取柱)
《SN/T4519-2016出口动物源食品中利巴韦林残留量的测定液相色谱-质谱质谱法》
一、样品提取
称取5.0g样品于50mL离心管中,加入浓度为1μg/mL同位素内标利巴韦林-13C5溶液10µL,加入12mL20g/L三氯乙酸水溶液和2.5mL乙腈,涡旋混匀30s,超声10min,于8000r/min离心5min,上清液全部转移至50mL离心管中,再向样品中加入10mL20g/L三氯乙酸水溶液重复提取一次,合并两次提取液,用三氯乙酸水溶液定容至25mL,再准确移取5mL,用氨水调节pH至8.5(±0.1)待净化(本实验是采用阴性样本做基质加标实验,故省略酶解步骤)。
二、SPE柱净化(PBA,100mg/3mL)
(1)活化:向PBA柱中依次加入3mL乙腈,3mL0.25mol/L乙酸铵缓冲液(pH=8.5)进行活化。
(2)上样和洗脱:取上述待净化液过柱,控制流速不超过1滴/秒,然后用3mL0.25mol/L乙酸铵缓冲液(pH=8.5)淋洗小柱,弃去全部流出液,抽干小柱,用2mL0.1mol/L甲酸水溶液洗脱,抽干小柱,收集全部洗脱液。
(3)上机:取上述洗脱液过0.22µmPES水系滤膜,供上机分析。
三、标曲配置
采用内标法定量,分别精密量取适量的利巴韦林标准溶液和同位素内标利巴韦林-13C5工作液,用0.1mol/L甲酸水溶液配制成适当浓度的标准工作溶液。
四、仪器条件
色谱条件:
仪器:UPLC-MS/MS(ThermoFisherTQSEndura)
色谱柱:CS211003H(HILIC,2.1mm×100mm,3µm)
流动相:A:5mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%甲酸)
B:乙腈
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
表1:梯度洗脱程序
时间/min |
A/% |
B/% |
0 |
5 |
95 |
2.0 |
5 |
95 |
3.0 |
20 |
80 |
3.5 |
30 |
70 |
4.5 |
5 |
95 |
5.0 |
5 |
95 |
流速:0.4mL/min
柱温:30℃
进样量:2µL
质谱条件:
离子源:HESI
电喷雾电压:3500V
鞘气压力:40arb
辅气压力:1arb
离子传输管:300℃
辅气温度:400℃
表2:组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子)
名称 |
保留时间/min |
母离子 |
子离子 |
利巴韦林 |
1.91 |
245.012 |
96.086,13.083* |
利巴韦林-13C5 |
1.90 |
250.05 |
96.083,113.071* |
五、实验结果
表3添加水平为2.0μg/kg动物源性食品中利巴韦林加标回收实验结果
目标物 |
基质 |
回收率(%) |
平均回收率(%) |
PSD(%) |
|||
1 |
2 |
3 |
4 |
||||
利巴韦林
|
鸡肉 |
106.3 |
103.2 |
107.2 |
107.6 |
106.1 |
2.0 |
鸡蛋 |
80.6 |
88.6 |
98.0 |
84.9 |
88.0 |
7.4 |
五、订购信息
货号 |
描述 |
包装 |
JYPBA3100 |
PBA固相萃取柱,100mg/3mL |
30支/盒 |
SF130-22-PES |
PES针式过滤器,直径13mm,孔径0.22µm,水系 |
100个/盒 |
MF047-45-MCE |
混合纤维素滤膜,直径47mm,孔径0.45μm,水系 |
100片/盒 |
MF047-22-NL |
NL滤膜,直径47mm,孔径0.22µm,有机系 |
100片/盒 |