HLB Lim-水产品应用系列之磺胺&喹诺酮
实验导读
HLB Lim 柱,是采用特殊吸附剂装填而成的一款新型固相萃取柱。与传统 SPE 柱相比, 它能更加快速有效地去除样品中脂肪、磷脂、色素等多种干扰物,减少基质效应;同时其极 大地简化了前处理流程,省去活化、平衡步骤,样品经提取后直接过柱,节省大量时间及试 剂,使前处理变得更加的简便高效。本方案采用 HLB Lim,成功地对鱼肉样品中 15 种磺胺&喹诺酮进行萃取净化,多个水平的加标都能获得较为满意的结果。
一、样品提取
准确称取粉碎均匀的鱼肉样品2.5 g于干净离心管中,加入10 mL 0.2%甲酸乙腈:水=80:20(V:V)溶液,涡旋混匀后超声提取20 min,8000 r/min离心5 min,待净化。
二、样品净化
取2 mL上述上清液过柱,收集流出液,取其中500 μL用10 mM甲酸铵定容至1 mL,上机。
三、 基质标准曲线溶液的制备
选同类型空白鱼肉样品,按上述前处理方法进行操作,收集过柱流出液,分别取流出液500 μL加入适量磺胺&喹诺酮标准溶液,再以10mM甲酸铵定容至1 mL,得到曲线浓度分别为0.5 ng/mL、1 ng/mL、2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL的上机溶液。
四、仪器条件
(1)色谱条件
仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)
色谱柱:Hypersil GOLD C18 (2.1 mm×100 mm,1.9 μm)
流动相:A:水(0.1 %甲酸) B:乙腈(0.1 %甲酸)
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
流速:0.3 mL/min
柱温:30℃
进样量:5 μL
表1 梯度洗脱程序
(2)质谱条件
离子源:HESI
电喷雾电压:3500 V
鞘气压力:40 arb
辅气压力:2 arb
离子传输管:380 ℃
辅气温度:350 ℃
表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子)
四、实验结果
表3 15种磺胺&喹诺酮加标回收实验结果
图1 添加水平为10 ng/mL时15种磺胺&喹诺酮的总离子流图
表4 15种磺胺&喹诺酮基质曲线信息